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注射級(jí)(無(wú)菌)海藻糖在低溫保存技術(shù)中的應(yīng)用有哪些?無(wú)菌的優(yōu)勢(shì)在哪?

更新時(shí)間:2025-10-21   點(diǎn)擊次數(shù):193次

現(xiàn)如今,隨著低溫保存技術(shù)(在低溫中,如:液氮、-70~-80℃深低溫冰箱保藏)的不斷完善,已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了諸多生物材料的低溫保存,例如血細(xì)胞、干細(xì)胞、精子、卵細(xì)胞、胚胎、角膜、皮膚、胰島等。血細(xì)胞的長(zhǎng)期保存供需不平解決了臨床上血液衡的問(wèn)題;干細(xì)胞的保存在zhiliao再生障礙性貧血、白血病中能減少抗宿主病的發(fā)生率;生殖細(xì)胞的保存對(duì)再生醫(yī)學(xué)和輔助生殖有著重大的意義;動(dòng)物胚胎保存為挽救瀕危動(dòng)植物帶來(lái)了極大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益;胰島的保存為qi官移植帶來(lái)了極大的便利。

海藻糖是低溫保存常用的非滲透性保護(hù)劑,這類保護(hù)劑分子不能進(jìn)入細(xì)胞,但可以提高胞外溶液的溶質(zhì)濃度,不僅能在細(xì)胞外形成高滲,減少胞內(nèi)冰的形成,還具有較高的玻璃化溫度,易形成玻璃態(tài),一方面避免了低溫對(duì)細(xì)胞膜蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的損傷,另一方面將細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)分子支撐包裹起來(lái),使之不易變形,yi制細(xì)胞膜融合,降低細(xì)胞膜的通透性。

①qi官保存:國(guó)外市場(chǎng)上,含海藻糖zui有代表性的是日本京都大學(xué)研制的肺臟qi官保存液,ET-Kyoto及New ET-Kyoto液,在國(guó)內(nèi)已申請(qǐng)ZhuanLi,原申請(qǐng)人為日本京都大學(xué),后轉(zhuǎn)至日本大冢制藥,在中國(guó)申請(qǐng)的發(fā)明ZhuanLi于2012年授權(quán)。

②細(xì)胞保存:目前研究中,應(yīng)用含不同濃度海藻糖的保護(hù)液,對(duì)低溫保存肝ai細(xì)胞、犬氣管困、卵巢ai細(xì)胞和宮頸ai細(xì)胞及小鼠受精卵,均取得了良好的保存效果。胎牛血清( FBS)也有助于細(xì)胞的冷凍保存,且在腸道腫liu組織原代細(xì)胞、牛成纖維細(xì)胞等低溫保存中效果良好。
Zheng等用麥管和石英毛細(xì)管作為冷凍載體,使用兩種滲透性保護(hù)劑EG和DMSO(體積分?jǐn)?shù)為8%、15%)及一種非滲透性保護(hù)劑海藻糖(0.5 M)玻璃化保存了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞( HUVECs)。結(jié)果表明,用1.4 M EG加1.1 M DMSO,并用石英毛細(xì)管玻璃化可以得到90%的存活率。

③胚胎保存:海藻糖單獨(dú)使用或與其它保護(hù)劑混合使用,均能對(duì)胚胎的保存起到良好的保護(hù)效果,Isachenko等使用含有海藻糖的玻璃化溶液保存山羊胚胎,發(fā)現(xiàn)保存后的胚胎不論在體內(nèi)還是體外均能達(dá)到較高的生存。

④皮膚保存:賈曉明等的研究表明,海藻糖作為一種新型的冷凍保護(hù)劑,對(duì)于皮膚組織的低溫保存具有良好的保護(hù)作用。其保護(hù)作用不僅體現(xiàn)在細(xì)胞骨架,還體現(xiàn)在對(duì)皮膚組織a-輔肌動(dòng)蛋白和p-整合素等的保護(hù)。

AVT的海藻糖(海保-99)具有低內(nèi)du素(實(shí)測(cè)值<0.1iu>

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